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PG电子技巧PGⅠ操作说明书发布日期:2024-12-07 12:19:35 浏览次数:

  

PG电子技巧PGⅠ操作说明书

  胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)定量检测试剂盒(化学发光法)【产品名称】胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)定量检测试剂盒(化学发光法)PepsinogenⅠ(PGⅠ)ChemiluminescentQuantitativeImmunoassayKit【包装规格】48人份/盒、96人份/盒【临床背景】胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)是胃分泌的一种消化酶前体,是胃液中胃蛋白酶的无活性前体,为一由375个氨基酸组成的蛋白多肽链,平均相对分子质量为42,000,人胃粘膜中有7组胃蛋白同工酶原。PG在核糖体上合成,由高尔基体分泌出细胞,被盐酸激活后变成胃蛋白酶。根据生化性质、免疫原性、细胞来源及组织内分布可分成PGⅠ、PGⅡ两个亚群,1~5组分免疫原性近似,称为PGⅠ(PGA),主要由胃腺的主细胞的粘液颈细胞分泌。胃蛋白酶原Ⅰ是胃蛋白酶原的一种,主要由胃底主细胞所分泌。亦有研究认为PG可由胃粘膜颈部粘液细胞或幽门腺粘液细胞所分泌。被HCl激活后变成小分子的胃蛋白酶。胃蛋白酶只在酸性环境中发挥作用,pH>6即失去活性;在pH=2时优先作用于天然蛋白质;pH=4时能消化某些特异性的肽。在体外,胃蛋白酶的持续作用可使蛋白分子的肽键约有30%分裂。胃蛋白酶不作用于角蛋白和黏蛋白,亦不作用于低相对分子质量的蛋白衍生物。在复合维生素与蛋白质结合和释放上,胃蛋白酶亦起主要作用。【预期用途】用于血清中胃蛋白酶原Ⅰ的定量检测。【贮存条件及有效期】1.本试剂盒在2℃~8℃贮存,防止冷冻,避免强光照射,有效期12个月。2.校准品启封后,2℃~8℃保存可使用21天,如果长期使用,应根据需要进行分装,于-20℃冻存。3.包被条拆封使用后,应将剩余包被条装入密封袋中,可保存至成品有效期。4.试剂盒其他组分使用后要及时回收到2℃~8℃条件,可保存至成品有效期。【适用仪器】半自动或全自动微孔板式化学发光检测仪。【样本要求】1.采用正确医用技术收集血清样本。2.样本中的沉淀物可能会影响试验结果,应离心除去,并确定样本未变质方可使用。3.严重溶血或脂血的样本不能用于测定。4.样本在24h内测定,则应存放于2℃~8℃冰箱中,如果长期使用,则应冻存于-20℃以下,避免反复冻融。使用前恢复到室温,轻轻摇动混匀。【检验方法】实验前准备:1.将试剂盒从冷藏环境中取出,放置室温(18℃~25℃)平衡至少30分钟。2.将恒温箱或水浴锅调到37℃,待温度稳定后使用。3.取1包固体洗液用500ml纯化水溶解后备用。实验步骤1.取出一定量的包被孔,每孔分别加入20µl校准品或血清样品。2.每孔分别加入酶结合物50µl。3.在微型振荡器上振荡30秒使孔内液体混合均匀,置37℃温育60分钟。4.洗板5次(推荐使用洗板机),最后在吸水纸上拍干。5.每孔分别加入发光底物A和B各50µl,室温(18℃~25℃)避光反应5分钟。6.化学发光检测仪检测发光强度。【结果计算】选择适当的曲线拟合方式,本试剂盒推荐使用线性回归拟和方程建立标准曲线,但也可根据不同情况采用其他拟和方式。以系列校准品浓度的对数值为横坐标(X轴),以系列校准品发光强度值的对数值为纵坐标(Y轴)建立标准曲线(log-log),进行计算。【参考值(参考范围)】用本试剂盒测定1000份正常人空腹血清样本,得到正常人空腹状态参考范围为大于65μg/l。与PGⅡ联合检测,正常人样本PGⅠ与PGⅡ比值的参考值大于7.5。各实验室应根据自己实际条件及接触人群建立正常参考值范围。本试剂盒仅作诊断的辅助手段之一,供临床医生参考。【检验结果的解释】1.本试剂盒检测结果不是临床适应症的确认指标,其临床诊断意义需结合其他检测指标及临床表现具体分析。2.本试剂盒线)μg/l。测定值超过200.0μg/l的样本,其结果是通过校准品曲线外延得出的计算结果。如果要获得其更准确的结果,需对样本进行稀释。3.环境中的强氧化剂会对检测结果有影响,实验中要远离此类物质。4.本试剂盒与其他厂家产品不同、检测方法不同,无直接可比性。【检验方法的局限性】本品用于血清样本的测定,用于其他体液样本中PGⅠ浓度测定的可靠性尚未得到充分确认。【产品性能指标】1.线.0μg/l。3.精密度:批内变异小于15%,批间变异小于15%。【注意事项】1.本产品仅用于体外诊断使用。2.操作前仔细阅读使用说明书,严格按照试剂盒内说明书进行试验操作。3.避免在恶劣的环境(如含有84消毒液、次氯酸钠、酸碱或乙醛等高浓度腐蚀性气体及灰尘的环境)条件下进行实验。4.包被条打开后,应将剩余包被条放入封袋中密封保存,以免受潮。5.微量移液器吸嘴不可混用,以免交叉污染。6.孔内样品需振荡混合均匀,不能有气泡存在。7.洗涤要彻底,洗液应注满每孔,但不可用水过猛,避免产生气泡。每次洗涤均应甩干孔内液体,最后应将孔内液体拍干。洗板推荐使用洗板机。8.处理试剂和样品时需戴一次性手套,操作后应彻底洗手。所有样本及使用后的试剂盒应视为潜在的传染性物质,废弃处理时,按照当地政府和国家有关规定进行。9.试剂需在有效期内使用。剩余试剂要及时密封,放置2℃~8℃条件下贮存。10.加入发光底物后要室温避光反应,强光可能影响测定结果。11.严格控制每步反应的时间和温度,操作应紧凑。

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